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原理都懂,就是分化不出滿意的肝髒AG8.AG亚游官网,怎麽破?
(“肝髒AG8.AG亚游官网模型”專題之03篇,進度條3/5)
 
人iPSAG8.AG亚游官网來源肝髒AG8.AG亚游官网作為新型的肝髒AG8.AG亚游官网模型,因為其可以持續供應相同遺傳背景的肝髒AG8.AG亚游官网而備受矚目。But,除了直接購買商品化人iPS來源肝髒AG8.AG亚游官网以外,如何在實驗室分化出特定供體來源的肝髒AG8.AG亚游官网呢?
 
■ 揭秘定向分化心法先
心法1:高度同質化的起始AG8.AG亚游官网
心法解讀:起始的多能幹AG8.AG亚游官网處於同一生長時期,擁有良好的未分化狀態和增殖狀態,無背景分化,同步接受後續的分化誘導。
心法2:模擬胚胎發育進程
心法解讀:通過添加或調整不同分化階段的分化誘導試劑,模擬胚胎內的時序變化,不建議使用自發分化的方法(如通過擬胚體EB分化)。
 
 
 
■ Takara肝髒分化試劑盒:您隻管按照Protocol做,分化不出滿意的肝髒AG8.AG亚游官网算我輸!
如果您讀了專題02篇:《用實力說話,Takara想憑這些數據在肝髒AG8.AG亚游官网模型界出道》,我想您可能會感慨這些Takara的iPSAG8.AG亚游官网來源肝髒AG8.AG亚游官网(Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 Kit)簡直就是別人家的孩子,表達肝髒AG8.AG亚游官网標誌物,顯示葡萄糖、脂質代謝調控,具備藥物代謝機製相關的CYP活性、II相酶活性等,我們在實驗室做不到啊……
沒錯,這確實要歸功於Takara穩定的肝髒定向分化Protocol,不過,這一定向分化方法,我們也做成了商品化的試劑盒在銷售。當當當當!它就是:
 
Code No. Product Size
Y30055 Cellartis® iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System 1 Kit
 
■ 技術特點一覽:
靈活:使用自定義的人iPSAG8.AG亚游官网來分化(Takara也有多款人iPSAG8.AG亚游官网在銷售)
方便:完整的試劑盒,無需另購試劑;均為即用試劑,無需花時間配製
穩健、易操作:提供標準的操作步驟,無需優化,多種人多能幹AG8.AG亚游官网係測試驗證
穩定的功能特性:與人原代肝髒AG8.AG亚游官网功能相似,詳見專題02篇
 
■ 實驗操作一覽(建議對照心法理解):
人多能幹AG8.AG亚游官网(ESCs/iPSCs)培養係統,呈現均勻地、非集落狀地、單層生長模式,無集落邊緣(集落邊緣容易出現分化),確保起始AG8.AG亚游官网處於高度同質化。
 
定型內胚層分化試劑盒,支持人多能幹AG8.AG亚游官网向定型內胚層(DE)AG8.AG亚游官网逐步分化,對應更換試劑盒中第0/1/2/3/4/6天的DE分化誘導試劑,誘導周期是7天。
 
肝髒分化試劑盒,支持DEAG8.AG亚游官网向肝髒AG8.AG亚游官网定向分化,逐步更換試劑盒中的起始培養基(第7天)、前體培養基(第9/11天)、成熟培養基(第14/16天)、維持培養基(第18天及後續),到第21天時,呈現典型的肝髒AG8.AG亚游官网形態,純度高達90%。試劑盒中提供的培養基可支持培養至第32天。
 
■ 這波操作真有這麽穩嗎?
以下這篇文獻Asplund et al. (2015)中,使用Takara的Cellartis® iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System(Y30050)成功將多種人iPSAG8.AG亚游官网係、ESAG8.AG亚游官网係分化至肝髒AG8.AG亚游官网,您就瞧好吧。
 
 
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■ 關注Takara“肝髒AG8.AG亚游官网模型”專題,了解Takara完善的肝髒AG8.AG亚游官网解決方案。
《01篇:“前浪、後浪”,能長時間維持肝髒AG8.AG亚游官网功能特性的就是好模型》
《02篇:用實力說話,Takara想憑這些數據在肝髒AG8.AG亚游官网模型界出道》
《03篇:原理都懂,就是分化不出滿意的肝髒AG8.AG亚游官网,怎麽破?》
《04篇:天啦嚕,這款人原代肝髒AG8.AG亚游官网培養基簡直Amazing! Unbelievable!》
《05篇:終篇幹貨,Takara肝髒AG8.AG亚游官网模型產品指南,請多指教》
 
 
 
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